牛奶蛋白质怎么测量（牛奶中酪蛋白的制备及其等电点的测定）

本文目录

• 牛奶中酪蛋白的制备及其等电点的测定
• 牛奶中水分、钙、铁离子、总蛋白、脂类含量的测定方法
• 凯氏定氮法测牛奶中蛋白质含量测定结果偏高是为什么
• 酸碱滴定法牛奶中的蛋白质原理步骤
• 牛奶中氮含量的测定单位
• 牛奶的粗蛋白跟粗脂肪怎么测
• 有一种鉴定牛奶中的蛋白质的方法叫什么达盖尔法的，谁能告诉我怎么回事

牛奶中酪蛋白的制备及其等电点的测定

牛奶中酪蛋白的制备及其等电点的测定如下：

一、原理：

牛乳中的主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的pH调至4.7时，酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质后便可得到纯酪蛋白。

二、材料、试剂与器具：

材料：新鲜牛奶。试剂：95%乙醇200mL，无水**200mL，0.2mol/L pH4.7醋酸——醋酸钠缓冲液 300ml。器具：离心机、抽滤装置、精密pH试纸或酸度计、电炉、烧杯、温度计。

先配A液与B液，A液：0.2mol/L醋酸钠溶液 称NaAC·3H2O54.44g，定容至2000ml。B液：0.2mol/L醋酸溶液，称优级纯醋酸（含量大于99.8%）12.0g定容至1000ml。取A液1770ml，B液1230ml混合即得Ph4.7的醋酸——醋酸钠缓冲液3000ml。乙醇——**混合液 乙醇：**=1 ：1（V/V）。

三、操作步骤：

1、酪蛋白的粗提：100mL牛奶加热至40℃，在搅拌下慢慢加入预热至40℃pH4.7的醋酸缓冲液100mL。用精密pH试纸或酸度计调pH至4.7。将上述悬浮液冷却至室温，离心15分钟（3000r/min）弃去清液得酪蛋白粗制品。

2、酪蛋白的纯化：用水洗涤沉淀3次，离心10分钟（3000r/min），弃去上清液。在沉淀中加入30mL乙醇搅拌片刻，将全部悬浊液转移至布氏漏斗中抽滤。用乙醇—**混合液洗沉淀2次。最后用**洗沉淀2次抽干，将沉淀摊开在表面上风干得酪蛋白纯品。

3、准确称重：计算含量和得率。含量：酪蛋白g/100mL牛乳（g%）式中理论含量为3.5g/100mL牛乳。

酪蛋白等电点测定就是以醋酸和酪蛋白溶液中的醋酸钠构成各种不同pH值的缓冲液，在某种溶液中，酪蛋白溶解度最小时，该溶液的pH值就是酪蛋白的等电点，实验中，缓冲液的pH值必须准确，不然会造成误差，导致实验结果不准确。酪蛋白，是一种大型、坚硬、致密、极困难消化分解的凝乳。

牛奶中水分、钙、铁离子、总蛋白、脂类含量的测定方法

水分用折光法，就是用光照射，然后用角度算折射率，再用公式计算水含量。蛋白一般用凯氏定氮法，不过不能分出含氮的其他物质。用*解法或双缩脲法比较好，但麻烦一点。用旋光性也可以。脂类一般先分离再测定。其他不太清楚啊

凯氏定氮法测牛奶中蛋白质含量测定结果偏高是为什么

测定蛋白质的方法可分为两大类:一类是利用蛋白质的物理化学性质来推算，如密度、折射率、紫外吸收、荧光性等;另一类是利用化学方法来计算，如定氮、双缩脲反应、染料结合反应、酚试剂反应等 主要测定方法有:双缩脲法、染料结合法、酚试剂法、紫外分光光度法、水扬酸比色法、折光法、旋光法、近红外光谱法.目前蛋白质测定最常用的方法是凯氏定氮法，是通过测总氮量来确定蛋白质含量的方法。 凯氏定氮法是通过测出样品中的总含氮量再乘以相应的蛋白质系数而求出蛋白质的含量,此法的结果称为粗蛋白质含量:由于样品中含有少量非蛋白质含氮化合物，如核酸、生物碱、含氮类脂、卟啉以及含氮色素等非蛋白质的含氮化合物.凯氏定氮法是测定总有机氮量较为准确、操作较为简单的方法之一，可用于所有动、植物食品的分析及各种加工食品的分析，可同时测定多个样品，故国内外应用较为普遍，是个经典分析方法。至今仍被作为标准检验方法.此法可应用于各类食品中蛋白质含量测定凯氏定氮法可分为全量法、微量法及经改进后的改良凯氏定氮法目前通常以硫酸铜作催化剂的常量、半微量、微量凯氏定氮法样品质量及试剂用量较少，且有一套微量凯氏定氮器。在凯氏法改良中主要的问题是，氮化合物中氮的完全氨化问题及缩短时间、简化操作的问题，即分解试样所用的催化剂。常量改良凯氏定氮法在催化剂中增加了二氧化钛.在理化实验室,检验食品中蛋白质的含量通常用微量凯氏定氮法和全量凯氏定氮法.接下来以大量的试验来比较微量凯氏定氮法和全量凯氏定氮法的精确度的大小.1.材料与方法:1.1试验材料1.1.1试验样品面粉1.1.2试验药品和试剂所有试剂均为分析纯;水为蒸馏水或同等纯度的水。硫酸铜;硫酸钾;浓硫酸;40%氢氧化钠溶液:称取40g氢氧化钠溶于60ml蒸馏水中;4%硼酸溶液:称取4g硼酸溶于蒸馏水中稀释至looml;0.1mol/l**标准滴定溶液;甲基红次甲基蓝混合指示液:将次甲基蓝乙醇溶液(1g/l)与甲基红乙醇溶液(1g/l)按1 2体积比混合。1.1.3仪器和设备: 实验室常规仪器及下列各项:凯氏烧瓶:500ml;可调式电炉;蒸汽蒸馏装置;铰肉机:篦孔径不超过4nm;组织捣碎机;粉碎机;研钵:玻璃或瓷质;化学消化器，凯氏定氮仪，空气滤过器1.2试验方法 1.2.1微量凯氏定氮法微量凯氏定氮法的原理 样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出，而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。然后取消化液的1/10加碱蒸馏，使氨蒸出，用硼酸吸收后再以标准**或硫酸溶液滴定。根据标准酸消耗量可计算出蛋白质的含量。包括消化、蒸馏、吸收、滴定四个步骤 1.2.2全量凯氏定氮法全量凯氏定氮法的原理 样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出，而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。然后取消化液的全部加碱蒸馏，使氨蒸出，用硼酸吸收后再以标准**或硫酸溶液滴定。根据标准酸消耗量可计算出蛋白质的含量。包括消化、蒸馏、吸收、滴定四个步骤2 分析过程试样制备:固体样品:取有代表性的样品至少200g，用研钵捣碎、研细;不易捣碎、研细的样品应切(剪)成细粒;干固体样品用粉碎机粉碎;液体样品:取充分混匀的液体样品至少200g。粉状样品:取有代表性的样品至少200g(如粉粒较大也应用研钵研细)，混合均匀;糊状样品:取有代表性的样品至少200g，混合均匀;固液体样品:按固、液体比例，取有代表性的样品至少200g，用组织捣碎机捣碎，混合均匀;肉制品:取去除不可食部分、具有代表性的样品至少200g，用铰肉机至少铰两次，混合均匀。上述试样应放入密闭玻璃容器中，于4°c冰箱内贮存备用，尽快测定。2.1微量凯氏定氮法的分析过程 2.1.1样品消化 :步骤:准确称取一定量的样品，加入硫酸铜0.5g、硫酸钾10g和浓硫酸20ml、玻璃珠数粒→小心移入干燥洁净的500ml凯氏烧瓶中(固体或粉末用纸卷成纸筒送入)，轻轻摇匀，以45

酸碱滴定法牛奶中的蛋白质原理步骤

凯氏定氮法1.原理样品与硫酸和催化剂一同加热后消化，使蛋白质分解，其中的碳和氢分别被氧化成二氧化碳和水蒸气逸出，而有机氮转化成氨后与硫酸结合生成硫酸铵，然后在碱性条件下蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再用硫酸或**标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即得蛋白质含量。（1）消化 将样品与硫酸混合催化剂混合加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵，溶解在消化液中。（2）蒸馏与吸收 在消化液中加入过量的氢氧化钠，并用水蒸气蒸馏，使硫酸铵释放出氨，再用硼酸吸收，使氨转化为四硼酸氢铵。 向消化液中加入氢氧化钠时，会产生蓝色溶液或褐色沉淀，这是由于消化液的铜离子与氨生成铜氨配离子或与碱生成氢氧化铜的缘故，这是正常现象。否则，若颜色不变，则说明加入的碱量不足，应补加，不然会造成氨的残留损失。（3）滴定 用标准**溶液滴定硼酸吸收液（即四硼酸氢铵），测得氮的含量，再乘以相应的蛋白质系数，推算出样品的蛋白质含量。乳及乳制品：6.38

牛奶中氮含量的测定单位

牛奶中蛋白质含量的测定 ---- 凯氏定氮法一：实验目的：掌握凯氏定氮法测定蛋白质含量的原理学会凯氏定氮法的操作技术二：实验原理：◆蛋白质的含氮量较恒定，一般为 16%，上下略有浮动 ◆N/16%=N*6.25=蛋白质的含量◆样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出，而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。然后加碱蒸馏，使氨蒸出，用硼酸吸收，再以标准**溶液滴定，测出释放的氨含量，并计算氮素含量，再乘以6.25即为蛋白质的含量。

牛奶的粗蛋白跟粗脂肪怎么测

一、可以运用罗紫一哥特里法来进行测试。原理：利用氨一乙醇溶液破坏乳的胶体性状及脂肪球膜，使非脂成分溶解于氨—乙醇溶液中，而脂肪游离出来，再用**一石油醚提取出脂肪，蒸馏去除溶剂后，残留物即为乳脂肪。 二、准备仪器与试剂：1、抽脂瓶；2、25％**（相对密度0.91）；3、96％乙醇 ；4、**（不含过氧化物）；5、石油醚（沸程30—60℃）三、步骤取一定量样品（牛奶吸取10.00ml；乳粉精密称取约1g，用10ml60℃水，分数次溶解）于抽脂瓶中，加入1.25ml**，充分混匀，置60℃水浴中加热5分钟，再振摇2分钟，加入10ml乙醇，充分摇匀，于冷水中冷却后．加入25ml**，振摇半分钟，加入25ml石油醚，再振摇半分钟，静置30min，待上层液澄清时，渎取醚层体积，放出一定体积醚层于一已恒重的烧瓶中，蒸馏回收**和石油醚，挥干残余醚后．放入l00—105℃烘箱中干燥1.5小时，取出放入干燥器中冷却至室温后称重，重复操作直至恒重。四、注意事项1、乳类脂肪虽然也属游离脂肪，但因脂肪球被乳中酪蛋白钙盐包裹，又处于高度分散的胶体分散系中，故不能直接被**、石油醚提取，需预先用**处理，故此法也称为碱性**提取法。2、本法适用于各种液状乳（生乳、加工乳、部分脱脂乳、脱脂乳等），各种炼乳、奶粉、奶油及冰淇淋等能在碱性溶液中溶解的乳制品也适用于豆乳或加水呈乳状的食品。3、若无抽脂瓶时，可用容积l00ml的具塞量筒替用，待分层后读数，用移液管吸出一定量醚层。4、加**后，要充分混匀，否则会影响下步醚对脂肪的提取。5、操作时加入乙醇的作用是沉淀蛋白质以防止乳化，并溶解醇溶性物质，使其留在水中，避免进入醚层，影响结果。6、加入石油醚的作用是降低**极性，使**与水不混溶，只抽提出脂肪，并可使分层清晰。7、对已结块的乳粉，用本法测定脂肪，其结果往往偏低。

有一种鉴定牛奶中的蛋白质的方法叫什么达盖尔法的，谁能告诉我怎么回事

你记错了吧，现在测定牛奶中蛋白质含量方法是凯式测氮法，因为蛋白质中含有肽键（-CO-NH-),一个肽键含有一个氮元素，所以测定氮元素就可以测定蛋白质含量，三鹿添加的三聚氰胺是氮元素含量很高的物质，添加它可以在检测中提高蛋白质含量